ЦМ Слаба јонска{0}}хроматографија са изменом мембране

СП Увод у производ мембранске хроматографије са изменом катјона 

 

2. Предности производа

Брз и ефикасан Висок капацитет везивања може се постићи при брзинама протока до 40 пута бржим од традиционалне хроматографије на смоли. У поређењу са конвенционалном хроматографијом на бази смоле{2}}, време процеса коришћењем мембранске хроматографије може се смањити за 30–40 пута. Типичан радни проток је око 10 МВ/мин.

2.2 Висока ефикасност везивања Мембранска хроматографија показује висок капацитет везивања и велике брзине протока при ниском паду притиска, омогућавајући да се наелектрисани биомолекули ухвате у једном пролазу кроз модул.

2.3 Скалабилност и флексибилност Комплетан асортиман производа за мембранску хроматографију може задовољити различите потребе пречишћавања биомолекула, покривајући апликације од развоја процеса до-производње великих размера. Дизајн капсуле омогућава једнократну{3}}употребу или се може очистити и поново користити након одговарајућих процедура чишћења.

2.4 Побољшана продуктивност Компактан дизајн минимизира отисак објекта. Елиминацијом операција као што су паковање колоне, чишћење, валидација чишћења и складиштење колоне, обрада може да почне након једноставне еквилибрације са релативно мање пуфера. Пошто нема потребе за паковањем колона, чишћењем или складиштењем, трошкови рада могу се смањити за више од 50%.

 

 

3 Технички параметри

3.1 Конструкцијски материјали

	Лабораторијска скала	мале размере	пилот размера	обим производње
запремина мембране	0,2мл	5мл	140мл	5L
Мембранска потпорна структура	полипропилен
мембранско кућиште	полипропилен
О прстен	Силицоне

3.2 Радне карактеристике

	Лабораторијска скала	мале размере	пилот размера	обим производње
запремина мембране	0,2мл	5мл	400мл	5L
Препоручени проток	1-6мл/мин	25-150мл/мин	2-12Л/мин	25-150Л/мин
Максимална радна температура	35 степени
Максимални радни притисак	3 бара (25 степени)
Максимална разлика притиска	3 бара (25 степени)
Услови складиштења	20% eтханолaкуеоусsрешење

Поређење показује да је радни век СП мембранске хроматографије упоредив са СП Сепхаросе 6ФФ.

Слика 1. Промене капацитета везивања СП мембранске хроматографије након вишеструких употреба тестираних са лизозимом

Поред тога, проценили смо ефикасност мембранске хроматографије у уклањању протеина и нуклеинских киселина ћелије домаћина. Резултати су следећи:

	ДНК				ХЦП
	ИгГ опоравак	Садржај (пг/мг ИгГ) помоћу РТ ПЦР		Фактор уклањања	Садржај (нг/мг ИгГ) од Елисе		Фактор уклањања
Трчи	%	Пре К мембране	После К мембране	Дневник	Пре К мембране	После К мембране	Дневник
1	96.4	423	3.6	2.07	7	4.3	0.21
2	97.4	438	4.3	2.01	7	4.7	0.17
3	94.1	513	5.8	1.95	6	2.3	0.42
4	96.2	32	0.8	1.60	6	3.2	0.27
5	96.3	45	1.9	1.37	8	3.4	0.37
6	96.7	158	2.4	1.82	8	3.5	0.36
7	96.4	267	2.6	2.01	9	6	0.18
8	96.8	298	3.6	1.92	9	7	0.11
9	97.9	746	9.8	1.88	4	1.5	0.43
10	96.2	39	3.2	1.09	4	1.4	0.46

Табела 1. Стопе уклањања ДНК и протеина ћелије домаћина у ЦХО-израженом ИгГ материјалу коришћењем СП мембранске хроматографије

Серија експеримената је показала да СП мембранска хроматографија може ефикасно уклонити контаминанте уз одржавање високе стопе опоравка циљног ИгГ.

Када упоредимо Гудилинг СП мембранску хроматографију са увозним брендовима, подаци о капацитету везивања су следећи:

Везивањеcапацити (мг/мЛ)	Сарториус	ПАЛЛ	Гуидлинг
лизозим	25	32	29
Трипсин	22	27	25

Табела 2. Перформансе капацитета везивања различитих протеина у нашем производу и конкурентским брендовима

Укупна процена показује да је наш капацитет везивања упоредив са капацитетом увезених производа.

Слика 2. Тест капацитета везивања модула СП мембранске хроматографије користећи лизозим као стандард

У поређењу са динамичким капацитетом везивања и увезеним производима, потврђено је да се већина циљних протеина може ухватити када се лизозим елуира у 190 мМ НаЦл.

Кроз различите услове елуирања, открили смо да су профили елуирања мембранске хроматографије слични профилима агарозног гела, али чистоћа протеина значајно варира при различитим концентрацијама соли. У стварном истраживању и развоју и производњи, неопходно је квантитативно одредити оптималне услове елуирања да би се добили циљни протеини високе{1}}чистоће.

 

4 Типични случајеви примене

Уклањање ДНК, вируса и протеина ћелије домаћина

Хватање плазмида, вируса, протеина и пречишћавање олигонуклеотида

Уклањање пигмената из ферментационог бујона квасца и хватање протеина великог{0}}капацитета

 

5 Процедура употребе

5.1 Припрема и монтажа опреме:

5.1.1: Инсталирајте модул за мембранску хроматографију на АКТА систем за хроматографију пратећи процедуре сличне колонама смоле, осигуравајући да је смер протока у складу са стрелицама модула и оријентацијом улаза. Повежите модул помоћу Луер брава или спојница у{2}}стилу за безбедну интеграцију у систем.

5.1.2 Подесите проток хране на5–10 МВ/мини дегас модул помоћу пуфера за еквилибрацију, обезбеђујући да ефлуент не садржи мехуриће ваздуха. Када се дегазира, спојите излаз пермеата са хроматографским системом.

5.2: Третман пре{1}}употребе:

5.2.1:

Подесите брзину протока хране на5–10 МВ/мини обавите пре{0}}третман са0,5 М НаОХ за више од 5 МВ, осигуравајући да мембрана постигне пуну равнотежу.

5.2.2: При истој брзини протока извршите пред-третман са1 М НаЦл за више од 5 МВкако би се осигурало да мембрана постигне пуну равнотежу.

5.3 Процес хроматографије

5.3.1 Подесите брзину протока на 5–10 МВ/мин и уравнотежите мембрану пуфером за еквилибрацију за више од 5 МВ, док мембрана не достигне пуну равнотежу.

5.3.2 После 0,22 μм пре-филтрације, убаците узорак на мембрану док се пуњење узорка не заврши или док се не достигне хроматографски капацитет везивања.

5.3.3 Испирати пуфером за еквилибрацију више од 10 МВ док се УВ сигнал не врати на основну линију.

5.3.4 Примијенити градијент елуирања или елуирање поступно према пројекту процеса и прикупити фракције према потреби.

5.4 ЦИП пост-третман након употребе – уређај за мембранску хроматографију ЦИП (чишћење на месту)

5.4.1 Подесите брзину протока на 5–10 МВ/мин и извршите чишћење са 1 М НаОХ за више од 10 МВ, све док УВ сигнал не падне испод основне линије.

5.4.2 Након циркулације од 30 минута, пређите на прање водом док пХ не достигне 7–8, а затим наставите са чишћењем са 20% етанолом док проводљивост не постане скоро константна.

5.5 Складиштење мембранске хроматографије

Након употребе и завршетка ЦИП-а, мембрански модул се може уклонити и чувати намакањем у 20% етанола, или се може чувати у-линији на собној температури у раствору који садржи 20% етанола. 20% раствор етанола треба периодично прегледати и заменити.

 

6. Информације о наручивању

Филтер за капсулу за мембранску хроматографију К јаке ањонске размене

	Лабораторијска скала	мале размере	пилот размера	обим производње
Модел производа	ИЕКСК0002ЕС	ИЕКСК0050ЕС	ИЕКСК0400ЕС	ИЕКСК5000ЕС
Мембране Волуме	0,2мл	5мл	400мл	5L

Popularne oznake: цм слабе јоноизмењивачке мембранске хроматографије, Кина, добављачи, произвођачи, фабрика, велепродаја, расути, на лагеру, бесплатни узорак