К јака ањонска мембранска хроматографија

 

2. Предности производа

2.1 Брз и ефикасан - постиже висок капацитет везивања при протоку до 40 пута брже од традиционалних смола. У поређењу са хроматографијом са упакованим слојем{4}}, време процеса коришћењем мембранске хроматографије је смањено за 30–40 пута. Типичан радни проток је 10 МВ/мин.

2.2 Висока ефикасност везивања - мембранска хроматографија показује висок капацитет пуњења и велике брзине протока под условима ниског пада притиска, омогућавајући да се наелектрисани биомолекули ухвате у једном пролазу.

2.3 Скалабилан и флексибилан - пуна серија производа за мембранску хроматографију може задовољити различите потребе пречишћавања биомакромолекула, покривајући све фазе од развоја процеса до-производње великих размера. Структурални дизајн типа капсуле{4}} подржава и једнократну-употребу и поновну употребу након чишћења.

2.4 Побољшајте продуктивност - Компактан дизајн минимизира отисак објекта. Елиминишући операције паковања колоне, чишћења, валидације чишћења и складиштења колоне, процес захтева мање пуфера за еквилибрацију и може се изводити директно без припреме колоне. Трошкови рада могу се смањити и до 50%.

 

3. Технички параметар

3.1 Конструкцијски материјал

	Лабораторијска скала	мале размере	пилот размера	обим производње
запремина мембране	0,2мл	5мл	140мл	5L
Структура носача мембране:	полипропилен (ПП)
мембранско кућиште	полипропилен (ПП)
О прстен	силикона

 

3.2 Радне карактеристике

	Лабораторијска скала	мале размере	пилот размера	обим производње
запремина мембране	0,2мл	5мл	400мл	5L
Препоручени проток	1-6мл/мин	25-150мл/мин	2-12Л/мин	25-150Л/мин
Максимална радна температура	35 степени
Максимални радни притисак	3 бара (25 степени)
Максимална разлика притиска	3 бара (25 степени)
Услови складиштења:	20% водени раствор етанола

 

Век трајања К мембранске хроматографије је упоредив са оним код хроматографије на агарозном гелу.

 

 

Слика 1. Промене у капацитету пуњења мембранске хроматографије након вишеструких употреба које прати БСА

Поред тога, проценили смо ефикасност уклањања мембранске хроматографије за протеине ћелије домаћина и нуклеинске киселине. Резултати су следећи.

	ДНК				ХЦП
	ИгГ опоравак	Садржај (пг/мг ИгГ) помоћу РТ ПЦР		Фактор уклањања	Садржај (нг/мг ИгГ) од Елисе		Фактор уклањања
Трчи	%	Пре К мембране	После К мембране	Дневник	Пре К мембране	После К мембране	Дневник
1	96.7	423	1.2	2.55	7	4.8	0.16
2	97.4	438	1.3	2.53	7	4.9	0.15
3	94.7	513	1.3	2.60	6	1.9	0.50
4	95	32	0.9	1.55	6	4.2	0.15
5	96.3	45	1.1	1.61	8	5.2	0.19
6	96.5	158	0.7	2.35	8	6.2	0.11
7	96.4	267	1.9	2.15	9	7.2	0.10
8	96.8	298	2.3	2.11	9	8.2	0.04
9	97.1	746	1.5	2.70	4	2	0.30
10	96.6	39	1	1.59	4	1.5	0.43

Табела 1. Стопе уклањања ДНК и протеина ћелије домаћина у ЦХО-експресованом ИгГ материјалу коришћењем К мембранске хроматографије

 

Серија експеримената је показала да К мембранска хроматографија може ефикасно уклонити нечистоће уз одржавање високог циљаног ИгГ опоравка.

Поред тога, упоредили смо Гудилинг мембранску хроматографију са увезеним брендовима, а подаци о капацитету пуњења су следећи:

Капацитет пуњења (мг/мл)	Сарториус	ПАЛЛ	Гуидлинг
БСА	29	60	45
СОД	25	40	35
Протеин А	27	45	40
Трипсин	30	56	44

Табела 2. Перформансе учитавања различитих протеина на нашем производу и производима конкурената

Укупна процена показује да је наш капацитет утовара упоредив са увезеним производима,

Слика 2.Користећи К мембрански хроматографски модул, БСА је коришћен као стандардни протеин за процену капацитета везивања. Динамички капацитет везивања је упоређен са капацитетом увозних производа. Резултати су показали да се већина циљног протеина може ухватити и елуирати са њим150 мМ НаЦлкада се користи БСА као модел протеина.

Кроз различите услове елуирања, открили смо да је понашање елуирања мембранске хроматографије слично хроматографији на агарозном гелу. Чистоћа протеина елуираних при различитим концентрацијама соли значајно варира. У стварном развоју и производњи процеса потребно је квантитативно одредити оптималне услове елуирања како би се добио циљни протеин високе чистоће.

 

4．Типичан случај примене

Уклањање ДНК, вируса, протеина ћелије домаћина (ХЦП) и ендотоксина

Хватање плазмида, вируса и протеина, као и пречишћавање олигонуклеотида

 

5. Оперативни поступак

5.1: Припрема и монтажа опреме:

5.1.1: АКТА хроматографски систем: Инсталирајте модул за мембранску хроматографију на начин сличан напакованим колонама. Уверите се да је смер стрелице на модулу у складу са смером протока хране. Повежите систем помоћу Луер конектора или Три-прикључака.

5.1.2 Подесите улазни проток на 5–10 МВ/мин и користите пуфер за еквилибрацију да уклоните ваздух из система. Након што се уверите да у излазној струји нема мехурића ваздуха, спојите излаз пермеата на систем за хроматографију.

5.2: Третман пре{1} употребе:

5.2.1:

Set the inlet flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with 0.5 M NaOH at >5 МВ да би се осигурало да мембрана постигне равнотежу.

5.2.2:

At the same flow rate, perform pre-treatment with 1 M NaCl at >5 МВ да би се осигурало да мембрана постигне равнотежу.

5.3 Процес хроматографије

5.3.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and perform pre-treatment with equilibration buffer at >5 МВ док мембрана не достигне равнотежу.

5.3.2 Након што се узорак претходно-филтрира кроз филтер од 0,22 μм, убаците га у колону док се не примени цео узорак или док се не достигне капацитет везивања хроматографијом.

5.3.3 Flush with equilibration buffer at >10 МВ док УВ сигнал не падне на основну линију.

5.3.4 Извршити градијент или линеарно елуирање према дизајнираном протоколу и прикупити фракције по потреби.

5.4 ЦИП третман након{1}}употребе – уређај за мембранску хроматографију ЦИП

5.4.1 Set the feed flow rate to 5–10 MV/min and treat with 1 M NaOH at >10 МВ док УВ сигнал не падне испод основне линије.

5.4.2 Након циркулације од 30 минута, пређите на прање водом док пХ не достигне 7–8, затим пређите на 20% етанол и наставите са прањем док се проводљивост не стабилизује.

5.5, Складиштење мембранске хроматографије:

Након употребе и завршетка ЦИП-а, мембрански модул се може раставити и чувати у 20% етанолу, или држати на мрежи на собној температури у 20% етанолу. Раствор етанола треба периодично заменити и прегледати.

 

6. Информације о наручивању

К Стронг анион{0}}Филтер за капсулу за хроматографију са изменом мембране

	Лабораторијска скала	мале размере	пилот размера	обим производње
Модел производа	ИЕКСК0002ЕС	ИЕКСК0050ЕС	ИЕКСК0400ЕС	ИЕКСК5000ЕС
запремина мембране	0,2мл	5мл	400мл	5L

Popularne oznake: к хроматографија јаке ањонске мембране, Кина, добављачи, произвођачи, фабрика, велепродаја, расути, на лагеру, бесплатни узорак