Одговори на професионална питања о центрифугалним цевима за ултрафилтрацију
1. Који је материјал мембране ултрафилтрационе цеви?
Полиетерсулфонска мембрана има јасно и тачно пресретање молекулске тежине, стабилне физичке и хемијске особине, изузетно ниску адсорпцију протеина и висок опоравак производа
2. Ако треба раздвојити протеине различите молекулске масе, колика је разлика у молекуларној тежини протеина?
Два протеина треба да се разликују по величини 10 пута или више
3. Може ли се епрувета за ултрафилтрациону центрифугу користити за концентрацију вируса?
Ултрафилтрациона центрифугална епрувета може концентрисати вирус много пута или чак много пута. Имамо специјалну мембрану за вирус. Различити вируси морају да изаберу одговарајућу величину поре на мембрани
4. Може ли се епрувета за ултрафилтрациону центрифугу дезинфиковати и отпорна на алкалије?
Може се дезинфиковати са 75-постотним воденим раствором етанола. Наш материјал може да издржи 0.1-0,5н алкално прање натријум хидроксидом
5. Може ли се ултрафилтрациона центрифугална епрувета користити за стерилизацију под високим-притиском
Имамо специјалну епрувету за ултрафилтрациону центрифугу погодну за стерилизацију под високим{0}}притиском
6. С обзиром на стабилност протеина, може ли се ултрафилтрациона епрувета центрифугирати на ниској температури?
Да, наш материјал је отпоран на ниске температуре, али време концентрације ће бити дуже. Брзина филтрације мембране је повезана са температуром напојне течности
7. О стопи опоравка
Генерално, стопа опоравка растворених материја са концентрацијом већом од 0.1мг/мл је 90 процената или више. Генерално, губитак узорака је узрокован неспецифичном адсорпцијом на површини филтерске мембране и површини цеви од материјала. Да би се постигла висока стопа опоравка, задржана молекулска тежина изабране филтер мембране је око 1/3 циљног протеина, ултрафилтрациона мембрана је асиметрична мембрана, њена величина пора је нормално распоређена и може да цури под центрифугалним високим притиском. притисак. Под овим условом, протеинска течност може бити деформисана, стога, што је мањи отвор за пресретање, то је спорији проток, али ће стопа опоравка бити већа
8. Када се протеин концентрише, долази до падавина. Како се носити с тим?
Ако се протеин концентрише пребрзо или превише, може изазвати преципитацију протеина. Коначна концентрација након концентрације протеина не би требало да буде превисока; За протеине који су осетљиви на брзину концентрације и који се лако таложе, предложене методе побољшања су следеће:
1) Смањите центрифугалну брзину,
2) Користите ултрафилтрациону мембрану са већом молекулском тежином
3) Дувајте и усишите цев за концентровање, а затим центрифугирајте
9. Који су могући разлози зашто се епрувета за ултрафилтрациону центрифугу не може центрифугирати?
Ако се ултрафилтрациона епрувета не може центрифугирати, почетно центрифугирање се може обавити са око 20 процената воденог раствора етанола, јер након што се ултрафилтрациона мембрана потпуно осуши, површина мембране је слабо хидрофобна, а флукс се може обновити након намакања са ниском површином. затезање растварача
10. Правилна употреба и очување ултрафилтрационе цеви
Ултрафилтрациона епрувета се прво центрифугира са пречишћеном водом пре употребе да би се проверио њен интегритет. Након сваке употребе, потребно га је чувати у влажном стању како би се спречило сушење мембране
11. Како уклонити ендотоксин из ултрафилтрационе цеви?
Ултрафилтрациона цев коју смо обезбедили није третирана ендотоксином. У исто време, због широко распрострањеног постојања ендотоксина у природи, узорци који захтевају унутрашње токсине могу се претходно очистити са 0.5Н натријум хидроксидом пре експеримента, а затим очистити РО водом да би се уклонио већи део ендотоксина
12. Када се концентровани протеин анализира низводно, открива се да постоји интерференција. Шта је разлог?
Ултрафилтрациона цев се може претходно очистити пуфером или пречишћеном водом. Ако сметња и даље постоји, очистите је са 0.1Н натријум хидроксидом, а затим га очистите пречишћеном водом
13. Може доћи до неспецифичне адсорпције између циљног протеина и ултрафилтрационе мембране у процесу концентрације. Како то побољшати?
Користимо хидрофилну полиетерсулфонску мембрану, али за неке протеине са посебним својствима, њихова неспецифична адсорпција са мембраном може бити побољшана. У овом случају, можемо покушати да предтретирамо ултрафилтрациону цев пре експеримента или контактирамо нашег инжењера
14. Након концентрације, утврђено је да у концентрату нема циљног протеина. Који су могући разлози?
1) Почетна концентрација протеина не би требало да буде прениска. Ако је концентрација прениска, мембрана се можда неће задржати
2) Изаберите одговарајућу величину пора на мембрани. Центрифугирање и концентрација ултрафилтрационе цеви спада у ћорсокак филтрације. Величина поре на мембрани је генерално мања од 2 пута или више од циљног протеина
3) Изаберите одговарајућу центрифугалну брзину
4) Да ли се циљни протеин преципитира







